关于“PHP色谱柱”的问题,小编就整理了【2】个相关介绍“PHP色谱柱”的解答:
色谱柱的分类与选择?1.硅胶基质
1.1反相色谱柱:反相色谱填料常是以硅胶为基础,表面键合有极性相对较弱的官能团的键合相。反相色谱所使用的流动相极性较强,通常为水,缓冲液与甲醇,已腈等混合物。样品流出色谱柱的顺序是极性较强组合最先被冲出,而极性弱的组份会在色谱柱上有更强的保留。常用的反相填料有C18(ODS)、C8(MOS)、C4(B)、C6H5(Phenyl)等。
1.2正相色谱:正相色谱用的固定相通常为硅胶(Silica),以及其他具有极性官能团,如胺基团(NH2,APS)和氰基团(CN,CPS)的键合相填料。由于硅胶表面的硅羟基(SiOH)或其他团的极性较强,因此,分离的次序是依据样品中的各组份的极性大小,即极性强弱的组份最先被冲洗出色谱柱。正相色谱使用的流动相极性相对比固定相低,如:正乙烷(Hexane),氯仿(Chloroform),二氯甲烷(MethyleneChloride)等。
1.3离子交换色谱柱:以磺化交联强阴/阳离子键合硅胶色谱柱,常用规格:强阴离子色谱柱(SAX),强阳离子交换色谱柱(SCX)
2.聚合物基质:聚合物调料多为聚苯乙烯-二乙烯基苯或聚甲基丙酸酯等,其主要优点是在PH值为1~14均可使用。相对与硅胶基质的C18填料,这类填料具有更强的疏水性;大孔的聚合物填料对蛋白质等样品的分离非常有效。现在的聚合物填料的缺点是相对硅胶基质填料,色谱柱柱效较低。
色谱柱跑空了怎么办?如果您的色谱柱跑空了,可能是以下几个原因导致的:
1. 柱子老化或损坏:如果柱子已经使用了很长时间或者受到了损坏,那么它可能会出现跑空的情况。在这种情况下,您需要更换柱子。
2. 进样量过大:如果您的进样量过大,那么可能会导致柱子跑空。您可以尝试减少进样量并重新运行分析。
3. 样品挥发性过强:如果样品挥发性过强,那么可能会导致柱子跑空。您可以尝试将样品密封或加热至较低温度以减少挥发性。
4. 柱子未正确安装:如果柱子未正确安装,那么可能会导致柱子跑空。在这种情况下,您需要检查柱子的安装是否正确,并重新安装柱子。
5. 流速过快或过慢:如果流速过快或过慢,那么也可能会导致柱子跑空。您可以尝试调整流速并重新运行分析。
如果您无法确定问题的根本原因,建议联系专业的技术支持人员进行进一步的诊断和修复。
只能说有可能,具体有没有气泡得具体看情况。如果柱子进了气泡,一来可能压力会升高,二来可能压力会忽上忽下,第三可能会出现诡峰。 跑空了确实对仪器影响很大,可能堵住单向阀、可能堵住泵,可能堵住柱子,也可能堵住检测器。
再运行的时候要先排气,把泵前的液体都排掉,然后观察压力,如果有明显的压力升高找出具体堵住的地方。哪里不好修哪里。
如果都还稳定,为了保险起见可以用0.3-0.5ml/min的流速,过夜冲洗异丙醇。
异丙醇的粘度很大,如果有气泡说不定可以带出来。
到此,以上就是小编对于“PHP色谱柱”的问题就介绍到这了,希望介绍关于“PHP色谱柱”的【2】点解答对大家有用。